Набор для экспресс-тестирования антигена малярии Pf/Pv (коллоидное золото)

Малярия — это гемолитическая лихорадочная болезнь, переносимая комарами, которая поражает более 200 миллионов человек и ежегодно убивает более 1 миллиона человек.Его вызывают четыре вида Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale и P. malariae.Все эти плазмодии заражают и разрушают эритроциты человека, вызывая озноб, лихорадку, анемию и спленомегалию.P. falciparum вызывает более тяжелые заболевания, чем другие виды плазмодиев, и на него приходится большинство смертей от малярии.P. falciparum и P. vivax являются наиболее распространенными патогенами, однако существуют значительные географические различия в распространении видов.

Традиционно малярию диагностируют по выявлению микроорганизмов на окрашенных по Гимзе толстых мазках периферической крови, а различные виды плазмодиев различают по их появлению в инфицированных эритроцитах.Этот метод позволяет поставить точный и надежный диагноз, но только в том случае, если он выполняется квалифицированными микроскопистами с использованием определенных протоколов, что представляет собой серьезные препятствия для отдаленных и бедных районов мира.

Экспресс-тест малярии Pf/Pv Ag разработан для решения этих проблем.Он использует антитела, специфичные к богатому гистидином белку-II P. falciparum (pHRP-II) и к лактатдегидрогеназе P. vivax (Pv-LDH), чтобы одновременно обнаруживать и дифференцировать инфекцию P. falciparum и P. vivax.Тест может быть выполнен необученным или малоквалифицированным персоналом без лабораторного оборудования.

Экспресс-тест малярии Pf/Pv Ag представляет собой хроматографический иммуноанализ с боковым потоком.Компоненты тест-полоски состоят из: 1) окрашенной в бордовый цвет прокладки с конъюгатом, содержащей мышиное антитело против Pv-LDH, конъюгированное с коллоидным золотом (конъюгаты Pv-LDH-золото), и мышиное антитело против pHRP-II, конъюгированное с коллоидным золотом (конъюгаты pHRP-II-золото), 2) полоска нитроцеллюлозной мембраны, содержащая две тестовые полосы (полосы Pv и Pf) и контрольную полосу (полоса C).Полоса Pv предварительно покрыта другим мышиным специфическим антителом против Pv-LDH для обнаружения инфекции Pv, полоса Pf предварительно покрыта поликлональными антителами против pHRP-II для обнаружения инфекции Pf, а полоса C покрыта козьим антимышиным IgG.

Во время анализа в лунку для пробы (S) тест-кассеты наливают достаточный объем образца крови, в лунку буфера (B) добавляют буфер для лизиса.Буфер содержит детергент, который лизирует эритроциты и высвобождает различные антигены, которые мигрируют под действием капиллярных сил по полоске, удерживаемой в кассете.Pv-LDH, если он присутствует в образце, будет связываться с конъюгатами Pv-LDH-золото.Затем иммунокомплекс захватывается на мембране предварительно покрытыми анти-Pv-LDH антителами, образуя полосу Pv бордового цвета, что указывает на положительный результат теста на Pv.В качестве альтернативы pHRP-II, если он присутствует в образце, будет связываться с конъюгатами pHRP-II-золото.Затем иммунокомплекс захватывается мембраной предварительно нанесенными анти-pHRP-II антителами, образуя полосу Pf бордового цвета, что указывает на положительный результат теста на Pf.Отсутствие каких-либо тестовых полос свидетельствует об отрицательном результате.Тест содержит внутренний контроль (полоса C), который должен иметь бордовую полосу иммунокомплекса конъюгатов козьего анти-мышиного IgG/мышиного IgG (анти-Pv-LDH и анти-pHRPII)-золота независимо от развития окраски на любой из тестовых полос.В противном случае результат теста недействителен, и образец должен быть повторно протестирован с другим устройством.