Подробное описание
Метод проверки
Существует три основных метода диагностики токсоплазмоза: патогенетическая диагностика, иммунологическая диагностика и молекулярная диагностика.Патогенное исследование в основном включает гистологическую диагностику, инокуляцию и изоляцию животных, а также культуру клеток.Обычные серологические методы диагностики включают тест с красителем, тест непрямой гемагглютинации, тест непрямой иммунофлуоресценции на антитела и иммуноферментный анализ.Молекулярная диагностика включает технологию ПЦР и технологию гибридизации нуклеиновых кислот.
Медицинское обследование беременных будущих мам включает в себя обследование под названием TORCH.TORCH — это сочетание первых букв английского названия нескольких патогенов.Буква Т означает Toxoplasma gondii.(Другие буквы обозначают сифилис, вирус краснухи, цитомегаловирус и вирус простого герпеса соответственно.)
Принцип проверки
Исследование возбудителя
1. Прямое микроскопическое исследование крови больного, костного мозга или спинномозговой жидкости, плевры и асцита, мокроты, жидкости бронхоальвеолярного лаважа, водянистой влаги, амниотической жидкости и т. д. на предмет мазков или лимфатических узлов, мышц, печени, плаценты и других срезов живой ткани, при окраске Рейха или Джи при микроскопическом исследовании можно обнаружить трофозоиты или кисты, но процент положительных результатов невелик.Его также можно использовать для прямой иммунофлуоресценции для обнаружения Toxoplasma gondii в тканях.
2. Инокуляция животных или тканевая культура Возьмите тестируемую жидкость организма или тканевую суспензию и инокулируйте ее в брюшную полость мышей.Может произойти заражение, и могут быть обнаружены возбудители.Когда первое поколение прививки отрицательное, его следует передать вслепую три раза.Или для тканевой культуры (почки обезьяны или клетки почки свиньи) для выделения и идентификации Toxoplasma gondii.
3. Технология ДНК-гибридизации. Отечественные ученые впервые использовали меченые 32Р зонды, содержащие специфические последовательности ДНК Toxoplasma gondii, для проведения молекулярной гибридизации с ДНК клеток или тканей в периферической крови пациентов и показали, что специфические полосы или пятна гибридизации являются положительной реакцией.И специфичность, и чувствительность были высокими.Кроме того, полимеразная цепная реакция (ПЦР) также была создана в Китае для диагностики заболевания, и по сравнению с гибридизацией зондов, вакцинацией животных и методами иммунологического исследования она показывает, что она высокоспецифична, чувствительна и быстра.
Иммунологическое обследование
1. Антигены, используемые для обнаружения антител, в основном включают растворимый антиген тахизоита (цитоплазматический антиген) и мембранный антиген.Антитела первых появлялись раньше (выявлялись окрашиванием и непрямой иммунофлуоресценцией), а вторые — позже (выявлялись в реакции непрямой гемагглютинации и др.).В то же время несколько методов обнаружения могут играть дополнительную роль и повышать скорость обнаружения.Поскольку Toxoplasma gondii может существовать в клетках человека в течение длительного времени, трудно отличить текущую инфекцию от перенесенной инфекции путем обнаружения антител.О ней можно судить по титру антител и его динамике изменений.
2. Детекционный антиген используется для выявления патогенов (тахизоитов или цист) в клетках-хозяевах, метаболитов или продуктов лизиса (циркулирующих антигенов) в сыворотке и жидкостях организма иммунологическими методами.Это надежный метод ранней диагностики и точного диагноза.Ученые в стране и за рубежом установили McAb ELISA и сэндвич-ELISA между McAb и мультиантителами для обнаружения циркулирующего антигена в сыворотке пациентов с острыми заболеваниями с чувствительностью 0,4 мкг/мл антигена.